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抗体发现

1. 噬菌体展示技术

与传统动物免疫法不同,噬菌体展示技术不使用动物而是运用分子生物学方法从抗体库中淘选与特定靶分子相结合的抗体片段来获得抗体。我们将自己独特的抗体库与独创的筛选技术相结合,获得具有独特功能的抗体。

人源抗体库

本公司拥有由世界最大规模的大容量人源性天然抗体库,包含了各种抗体谱,极富多样性。利用此抗体库可以获得识别不同靶抗原表位的抗体群,也可以获得识别自身抗原的抗体。

骆驼抗体库

骆驼抗体(VHH抗体)不包含轻链,仅由重链组成。因此可以融合其他蛋白质,制造成各种修饰抗体来适合各种用途。此外骆驼抗体还具有分子量小,易于生产,热稳定性高的特点。
本公司基于从多个骆驼的脾脏中收集的淋巴细胞构建了具有各种优良特性的VHH抗体序列库,拥有不同重链长度γ2、γ3的VHH抗体库和抗人IgMμ链单克隆抗体库。

噬菌体抗体库筛选

通常的方法是将抗原固定在载体上对噬菌体抗体库进行淘选获得抗体。此法最大的弊病是在抗原固定的过程中会影响一些重要表位的暴露因而不能获得目的抗体。我们独特的筛选方法是使用表达抗原的细胞,这样可以保证细胞表面的蛋白质的立体结构没有受到影响,重要的表位没有丢失,因此可以很容易获得具有功能的抗体。此独创的筛选技术(ICOS法:Isolation of antigen/antibody Complexes through Organic Solvent method )已经获得专利权,是我们重要的技术平台之一。
除此之外,对于常规免疫法难以获得抗体的抗原,比如低分子化合物、糖链、脂类等我们也开发出了最佳的筛选方法,对于这些物质都能获得抗体。

2. 小鼠杂交瘤技术

用抗原免疫小鼠,是制备抗体细胞(杂交瘤细胞)的极为可靠的一种传统方法。许多蛋白质的表位在多个动物种属中具有良好的同源性,因此用这种传统方法获得的抗体通常具有局限性,获得具有功能的抗体的机率也比较低。为了获得具有功能的抗体,我们与东京大学进行了长期的共同研究,运用最新的研究成果,再结合我们在免疫佐剂和给药方法方面的经验,可以大大提高获得具有功能性的抗体的机率。

抗体工程

1. 抗体序列分析

精确的抗体序列对于抗体的人源化或者抗体序列修饰等下游操作非常重要。本公司独自设计的特异性引物为能够从其起点准确确定抗体可变区域序列。

2. 抗体设计

利用从杂交瘤获得的抗体序列或者是从噬菌体抗体库获得的抗体片段序列,通过抗体工程设计,可以根据需求获得人源化抗体,全人源抗体,嵌合化抗体或者Fab型、scFv型等多种抗体,还可应用于CAR-T。通过抗体设计为临床应用提供最佳治疗方法。

靶点选择

在新药开发中最重要的一点是治疗靶点的选择和确定,对此我们采用以下方法来选择靶点。

1. 转录组分析

通过与东京大学尖端科学技术研究中心合作,利用此中心油谷浩幸教授所开发的具有世界领先水平的转录组数据库来发掘治疗靶点,开发用于癌症治疗或者诊断的抗体。

2. 逆转录组分析

利用各种疾患的细胞(例如癌细胞)从噬菌体展示抗体库中淘选抗体片段。然后再对与此抗体片段结合的蛋白质进行质谱分析,从而确定靶点分子。利用此方法,可以在确定靶点的同时也获得具有功能性的抗体,大大缩短了抗体开发的时间。

功能蛋白表达

要获取高特异性和亲和力的抗体,抗原至为重要。一方面要有足够的抗原量,另一方面抗原又必须保留天然的结构和原有的功能。对跨膜蛋白的表达来说,这不是一件易事。我们引进了东京大学尖端科学技术研究中心浜洼隆雄教授开发的Baculovirus(杆状病毒)技术。利用此技术,我们可以高效表达保持天然构造的膜蛋白,直接将大量表达目的蛋白的杆状病毒做为抗原对小鼠进行免疫,从而获得各种抗体。许多常法难以表达的跨膜蛋白利用此方法可以大量表达,作为抗原使用。